Недавно вышло сообщение о рождении здорового мальчика весом 3.8 кг в феврале 2020 г в результате ЭКО в Бразилии. Особенность этого случая заключается в том, что пара использовала два подхода генетического тестирования для предупреждения хромосомных аномалий у будущего ребенка: ставший уже классический метод ПГТ-А, в ходе которого анализируется биоптат — несколько клеток трофэктодермы эмбриона, и неинвазивное преимплантационное генетическое тестирование

Генетическое тестирование эмбрионов перед их переносом в полость матки женщины в рамках программы ЭКО позволяет повысить частоту имплантации и тем самым значительно сократить время наступления беременности, что особенно актуально для пациентов старшего репродуктивного возраста, а также добиться рождения здорового ребенка в случаях, когда у пары отмечается высокий риск наследования генетического заболевания. В настоящее время для проведения генетического тестирования на 5-6 сутки, когда эмбрион достиг стадии бластоцисты, проводят биопсию, в ходе которой отбирают 3-5 клеток трофэктодермы, которые отправляют в генетическую лабораторию. В лаборатории на первом этапе выделяют ДНК и ее амплифицируют — увеличивают количество копий, а затем при использовании технологии секвенирования нового поколения (от англ. NGS — next generation sequencing) определяют последовательность нуклеотидов (отдельных «бусинок», если представить ДНК в виде нитки бус), которая потом анализируется на ошибки в порядке следования нуклеотидов. Основные недостатки используемого подхода заключаются в инвазивности процедуры и возможной мозаичности эмбрионов, имея в виду нерелевантность экстраполяции результата генетического тестирования ДНК из клеток трофэктодермы на клетки самой внутренней клеточной массы. Ввиду вышеперечисленных причин неинвазивное преимплантационное генетическое тестирование на анеуплоидии (niPGT-A — от англ. Non-invasive preimplantation genetic testing for aneuploidies), при котором выполняется оценка бесклеточной эмбриональной ДНК, выделенной эмбрионом в процессе культивирования в питательную среду, в которой он рос, является крайне перспективным и многообещающим подходом. Однако к настоящему времени в научно-клинической сфере к этой технологии отмечается недоверие из-за крайне противоречивых данных о сходимости результатов от 30.3 до 85,7% при сравнении результатов тестирования классическим подходом ПГТ-А и новым niPGT-A. В упоминаемом исследовании Rubio et al. в статье по сравнению результатов при использовании подходов классического ПГТ-А и niPGT-A конкордантность при двойном генетическом анализе 1301 образцов составила 78,2%, а также привело к рождению первого ребенка после проведения тестирования методом niPGT-A.

Ребенок родился у пары, которая обратилась в клинику ЭКО в 2018 году. На тот момент возраст женщины составлял 35 лет, мужчины — 37 лет. У пациентки был сохранен овариальный резерв, концентрация АМГ составляла 2.65 нг/мл, индекс массы тела был 20.2 кг/м2. У мужчины были нормальными основные показатели спермограммы (концентрация, подвижность, морфология), однако отмечался повышенный индекс фрагментации ДНК (39%), а также избыточная масса тела (индекс массы тела составлял 28.4 кг/м2). У пары не отмечено бесплодие в анамнезе, и они были заинтересованы в использовании ПГТ-А для минимизирования рисков рождения ребенка с генетическими аномалиями. После контролируемой стимуляции суперовуляция препаратами рекомбинантного ФСГ и мочевого менопаузального гонадотропина при пункции яичников получено 21 клеток, 18 из которых были зрелыми. При оплодотворении методом интрацитоплазматической инъекции сперматозоида, ИКСИ (от англ. ICSI–IntraCytoplasmic Sperm Injection) получили 18 зигот, из которых к 5-6 суткам культивирования сформировалось 11 бластоцист: 3 к пятому дню культивирования и 8 бластоцист — к 6 дню развития. Генетическое тестирование методом niPGT-A проводилось только для бластоцист 6 дня развития виду того, что тестирование бластоцист 5 суток методом niPGT-A авторы объясняют низкой сходимостью результатов, выявленной ранее. Результаты генетического тестированиях подходами классического ПГТ-А и niPGT-A для эмбрионов № 4-11 представлены в Табл. 1.

Таблица 1 — Результаты генетического тестированиях подходами классического ПГТ-А и niPGT-A эмбрионов № 4-11

К переносу в рамках криопротокола был разморожен эмбрион № 4, при генетическом тестировании двумя подходами которого наблюдалась полная сходимость результатов. Профили секвенирования методами ПГТ-А и niPGT-A представлены на Рис. 1.

Рисунок 1 — Профили секвенирования методами ПГТ-А и niPGT-A эмбриона № 4

В результате переноса эмбриона № 4 наступила беременность, завершившаяся рождением здорового мальчика весом 3.8 кг в феврале 2020 г.

Источники:

• Kulmann MIR, Riboldi M, Martello C, Bos-Mikich A, Frantz G, Dutra C, Donatti LM, Oliveira N, Frantz N. First Baby Born in Brazil after Simultaneous Diagnosis through Non-Invasive and Conventional PGT-A. Rev Bras Ginecol Obstet. 2021 Nov; 43(11): 878-882. English. doi: 10.1055/s-0041-1736302.

бесплодие #генетическое тестирование #ПГТ #niPGT-A